产品名称：免提取支原体检测试剂盒（qPCR法）

货    号：MTM100\MTM25

规    格：100T\25T

存储条件：负20摄氏度，避光

有 效 期：一年

仅科研使用 Research Use Only

产品简介

支原体是目前发现的最小、最简单的、可以独立生存的原核微生物，大小约在0.1~0.3 μm之间，无细胞壁，能够通过0.2 μm细菌过滤器。支原体在自然界中分布广泛，种类繁多，在细胞培养过程中， 20%以上的细胞会受到支原体污染，因此支原体检测已成为医药研发、科学研究、生产制造等领域的必要流程。

本品依据Taqman探针法，采用多种引物组合，可检出上百种常见的支原体，包括口腔支原体、肺炎支原体、精氨酸支原体、牛支原体、山羊支原体、家禽支原体等，可有效满足常规支原体污染检测。

产品特点

灵敏度高

每个反应最低可检测到1个拷贝的支原体基因组；

特异性强

通过特殊的引物组合，可以特异性确定支原体污染，排除因引物问题而出现的假阳性问题；

操作简单

便捷，只需将模板与引物及酶混合在一起即可使用，无需对待测物进行核酸纯化，全程1个小时左右即可完成检测。

可靠性高

本品添加了ROX染料标记的内部控制系统，可以有效判断PCR体系是否正常工作，保证数据的可靠性以及稳定性。

组分（MTM100为例）

2×Mycoplasma qPCR Mix（1 mL），-20℃

5×Mycoplasma qPrimer Mix（400 μL）,-20℃及以下，避光

Mycoplasma Positive Control（100 μL），-20℃及以下

RNase-free ddH2O（1 mL）

使用方法

1. 取出试剂，于冰上融化，*颠倒混匀数次*。(重要)
2. 将PCR管置于冰中，分别加入4 μL 5×Mycoplasma qPrimer Mix 和4 μL无菌水，再分别加入10 μL 2×Mycoplasma qPCR Mix，轻轻吹打混匀（建议每个样品做两个重复，以排除操作误差）。
3. 分别加入待测样品2 μL，阴性对照加入2 μL无菌水，最后再加入2 μL阳性参照（建议先加阴性对照，再加待测样品，最后再加阳性参照）。
4. 盖上盖子，离心机瞬时离心，置于qPCR仪进行扩增反应。

qPCR设置程序：

本品含有两种荧光修饰的探针，支原体特异性探针采用FAM荧光染料修饰，内部控制探针采用ROX荧光染料修饰，故在收集荧光探针时应选择FAM和ROX双荧光通道进行信号采集。若所用荧光定量仪为单荧光信号通道，则选择FAM荧光信号通道即可。

结果判定：

注：本试剂在ABI 7500荧光定量仪中，1个拷贝的阳性参照的Ct约在39左右，ROX通道的Ct值约在32左右，不同的定量仪所测出来的数值会有所差别。Ct值越小，代表待测样品中检出的支原体基因组数量越高，若ROX通道的Ct值越大，代表待测物中所含的DNA聚合酶抑制剂含量越高，或者引物探针出现降解，抑或是DNA聚合酶失活，若两种信号通道接近40 Ct时（包括阳性参照），请检查确认是否由于酶及引物没有混匀、或者酶失活及探针降解导致的。

注意事项：

1. 本品含有HotStart DNA Polymerase，不能用来检测高盐、醇类等对酶有害的试剂，如需检测此类试剂中的支原体污染，应先进行支原体DNA纯化再进行检测；
2. 为了使本品达到最佳性能，初次使用时建议分装成小份保存；
3. 2×Mycoplasma qPCR Mix和5×Mycoplasma qPrimer Mix应使用时再混合；
4. 所用PCR管、枪头等最好高温灭菌处理，以排除支原体残留DNA的影响；
5. 本品仅限于科学研究使用，不得应用于临床诊断。

质量保证

无忧售后：使用过程中有任何问题，可联系我们；产品质量问题我们保证可靠售后。

购买信息

价格优惠：具体价格请咨询库源生物销售团队或经销商。

购买渠道：您可以通过库源生物销售团队以及官方网点（淘宝、京东、拼多多、小红书）或联系经销商进行购买。