细胞培养支原体污染 PCR 检测使用说明书

产品名称：免提取支原体检测试剂盒（Direct PCR Mycoplasma PCR Detection Kit ）

产品货号：CR1005-C-18

产品规格：100T

试剂盒组成：All-in-One Ready-to-Go PCR master mix 2.1ml；阳性对照样本（20ul）。

试剂盒保存：-20℃ 保存。

产品介绍：

本公司研发的免提取支原体 PCR 检测试剂盒是一种灵敏度高、操作简单、快速的支原体检测方法。几乎覆盖所有支原体种类，无需提取 DNA，直接采用细胞培养上清进行 PCR 反应，能在 2  小时内获得可靠的结果。该试剂盒具有如下特点：

1. 灵敏：可检出细胞培养上清液中 < 50 cfu/ml 的支原体。
2. 广谱：覆盖 50 多种 Mycoplasma 以及 Ureaplasma、Mesoplasma、Spiroplasma、Acholeplasma 和 Phytoplasma。
3. 简单：操作时仅需加入 4ul 的细胞培养液于 PCR 反应管。
4. 快速：可在 2h 内完成检测任务。
5. 直观：通过与内参 DNA 扩增效果的比较，可清晰判断支原体的污染程度。

操作步骤(以20ul体系为例）：

1. 样品准备：细胞培养 48 小时后，收集少量（0.2ml）细胞培养上清于 0.5ml 管中
2. PCR 加样：取 2ul 细胞上清液于 All-in-One Ready-to-Go PCR 反应管中。取18ul预混mix，混匀后PCR检测。

3、PCR 反应：

95℃ 5 min

95℃ 20 s，62℃ 30 s，72℃ 60 s ，35 cycles

72℃ 10 min

4、PCR 产物电泳：提前准备好 1.5%琼脂糖凝胶，取 5ul PCR 反应液进行电泳分析。

结果分析：