CR1005-B-100伯克霍尔德菌属检测试剂盒
产品编号：CR1005-B-100
产品规格：100T
产品规格：100T
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伯克霍尔德菌属检测试剂盒（100T）Burkholderia Detection qPCR Kit (100T)
产品名称 产品货号 规格 储存条件 有效期 伯克霍尔德菌属检测试剂盒 CR1005-B-100 100T -20℃，避光 12 个月 产品简介伯克霍尔德菌属是伯克氏菌科下的一类具有鞭毛、可游动的革兰氏阴性菌（鼻疽伯克霍尔德菌无鞭毛），广泛分布在水、土壤、植物和人体中，该属目前已发现 24 个种及上百种亚种，其中最具代表性的是洋葱伯克霍尔德菌复合菌群。洋葱伯克霍尔德菌群是生物制药行业引起水系统污染、行程管道生物膜，进而对高水分活度药品造成严重风险的典型代表微生物。它们抗逆性强，能够在寡营养的条件下如纯水中存活，甚至在 12℃或 48℃条件下仍然能够生长繁殖，对多种抗生素、消毒剂和抑菌剂具有天然抗性，同时也是条件致病菌，已经被 FDA 明确为不可接受微生物。在细胞培养方面，伯克霍尔德菌甚至可以寄生在细胞内并在细胞内增殖，这无疑增大了伯克霍尔德菌的检测难度以及清除难度。本试剂盒采用 Taqman 荧光探针法，利用特异性引物可以有效鉴定出伯克霍尔德菌属的污染，特异性强，与人类基因组、大肠杆菌等物种基因组无交叉反应；扩增效率高，最低可检测到 1 个拷贝的微生物基因组；使用方便，可直接将待测样品加入到预混液即可检测。试剂盒组成 产品名称 规格 储存条件 2×qPCR Burk Mix1mL -20℃，避光 5×Burk Primer Mix 400μL -20℃，避光 Burk Positive Control 200μL -20℃，避光 ddH2O 1mL -20℃，避光 使用方法1. 将以上试剂于室温中充分融化，用移液枪反复吹打混匀后，将其分装到高温高压灭菌后的新的离心管中，冻存于-20℃环境中。2. 在超净工作台中，取无菌 qPCR 管于冰中，按照每个反应 20μL 的体积计算，按比例分别加入4μL 5×Burk Primer Mix、4μL ddH2O（高温高压灭菌处理）、10 μL 2×qPCR Burk Mix，移液枪反复吹打混匀，每个样品建议准备 3 个重复。另外各准备 3 个样品孔，分别加入 2μL 无菌 ddH2O 和 2μLBurk Positive Control 作为阴性对照和阳性对照。3. 取 2 μL 待测样品加入到 PCR 预混液中，盖上管盖，离心机中瞬时离心，放入到 qPCR 定量仪中。4、反应程序设置
预变性95℃ 5min 变性 95℃ 15s 退火 62℃ 15s 延伸 72℃，FAM 收集荧光 20s 循环数 45 Cycles 5、结果判定
阳性对照/Ct 阴性对照/Ct 待测样品/Ct 结果判断 ＜45 N.A ＜45 有伯克霍尔德菌污染 ＜45 ＞35＆＜45 ＞35＆＜45 可能是操作引入污染所致 ＜45 ＞35＆＜45 ＜35 有伯克霍尔德菌污染 ＜45 ＜35 ＜45 试剂引入了污染，更换试剂重测N.A N.A N.A 试剂保存不当导致失活，或者 PCR mix 没有充分融化完全 N.A N.A ＜45 PCR mix 没有充分融化完全，需要重测 ＜45 N.A N.A 无伯克霍尔德菌活菌污染 注意事项1. 2×qPCR Burk Mix 含有高浓度 Mg2+等组分，低温及反复冻融时易析出，在试剂融化后要颠倒混匀使其组分充分溶解并澄清后再使用；2. 由于伯克霍尔德菌在环境中分布广泛，极易使得试剂被污染，建议首次使用前先将试剂分装成小份储存，以避免试剂全部被污染；3. 待测样品如果含有对 Taq DNA 聚合酶具有抑制作用的物质，建议用 DNA 提取试剂盒纯化待测样品后再进行检测；4. 在加入阳性参照时，建议将其最后加入，以防止气溶胶污染待测样品孔以及阴性对照孔；5. 本品仅用于科学研究使用，不能用于临床诊断。 -
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现价：
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1800.00
