注意事项：

• 细胞插件一定要保持干燥，放置的培养皿在放置插件前一定要洁净无水，否则会降低插件的粘附性；
• 由于插件横隔较薄，在生产处理过程中可能会造成形变，导致细胞渗透到横隔中，建议使用前用镊子夹住插件横隔平行边缘两侧，使其恢复正常形态后，再将插件放入培养板内；
• 将细胞转移至插件后，应在显微镜下观察横隔中是否有细胞渗入，如有细胞渗入，说明横隔没有压好或者出现了变形，应将细胞吸出，重新更换一个新的插件；
• 一个插件适合拍摄1~2张照片，如果想获取更多照片，建议您放置多个插件进行重复实验，如在6 cm细胞培养板中可以放置多个插件；
• 如果您要使用处理组和对照组，建议您在消化细胞前就对细胞进行药物处理，因为基因表达需要一定的时间，等处理效果开始显现之后再将细胞消化并接种到插件内进行观测；
• 对于贴壁能力较弱的细胞，在清洗时一定要尽可能缓慢且轻柔，否则极易将细胞洗去；清洗细胞时可以使用1×PBS，但对贴壁能力较弱的细胞，建议使用完全培养基进行清洗；
• 细胞插件为硅胶材质，易吸附其他杂质导致吸附能力减弱，不建议您多次重复使用；如您需要重复进行使用，建议您确保清洗干净后灭菌再使用；
• 完整包装的插件应保存在阴凉干燥的地方，避免放置在湿度较高的地方；

使用步骤

1. 将插件外包装喷洒75%乙醇，置于细胞房的生物安全柜中；
2. 取一个新的细胞培养板（最小能兼容24孔板），置于生物安全柜中；
3. 用酒精灯灼烧镊子并冷却至室温，撕开插件包装，用镊子夹出插件置于培养板中间如图1所示；

图 1

4. 用镊子轻轻压下插件横隔两端，同时用镊子轻压插件横隔和周边，使插件底部贴紧培养板，如图2所示；

图 2

5. 用胰蛋白酶消化细胞后，将其稀释至5×10⁵~1×10⁶个细胞/mL，取70~100μL细胞悬液加入到插件两孔中；
6. 盖上培养皿盖子后，在37℃ 5% CO₂培养箱中培养6h以上，直至细胞全部贴壁；
7. 用移液器将多余培养基吸走，用无菌镊子夹住插件一角，如图3轻轻地将插件揭起去掉；

图 3

8. 将培养皿倾斜30~45°，在底部最边缘一侧加入1mL完全培养基，然后缓慢地将培养皿放平，直至培养基完全浸没细胞，再继续倾斜，使培养基流到加液测的另一侧，弃去培养基，如此反复清洗2~3次，洗去未贴壁的残余细胞，如图4所示；

图 4

9. 如同步骤8一样，加入适量的培养基，如图5将细胞置于培养箱中培养，如图6在一定的时间内观察细胞的迁移情况并拍照记录。

图 5

图 6