支原体清除试剂盒 CR1005-P-0006S；CR1005-P-003S；CR1005-P-006S

产品名称：支原体清除试剂盒

货号： CR1005-P-0006S；CR1005-P-003S；CR1005-P-006S

规格： 3X200μL/盒；3X1mL /盒；6X1mL /盒

存储条件： -20℃，避光  

有效期： 一年  

仅科研使用 Research Use Only

产品简介

支原体清除试剂盒是专门针对动物细胞培养过程出现支原体污染的而开发的清除试剂盒。普通的抗生素虽然对支原体有一定的抑制作用，但是不能彻底清除支原体，在去除抗生素后支原体往往又会大规模爆发，而且长期使用某些抗生素不但会对细胞产生毒性，而且会导致支原体出现耐药性进而更加难以抑制。此外，普通的抑制清除手段处理周期较长，效果不显著，而且某些抗生素会严重影响细胞某些基因转录以及翻译，严重影响了客户的实验时间分配以及实验资源的合理利用。为此，我司开发出了一款可以快速且彻底清除支原体污染的试剂盒，本试剂盒最快可以在1周内将支原体彻底清除，清除后连续多次传代培养也未见支原体复发，且对多种细胞进行了验证，包括HEK293、HUVEC、SIHa、SH-SY5Y、HEEC、PANC-1、M14、A375、HT-3等，均显示出了极为有效的清除效果。而且除去该清除试剂后，细胞生长不受影响，是极为有效的支原体清除手段。

广谱清除

针对多种支原体类型具有优异清除效果，包括肺炎支原体、人型支原体、口腔支原体等，覆盖细胞培养中最常见的支原体污染种类。

细胞友好

优化的药物配比和浓度设计，最大限度减少对宿主细胞的毒性作用，保护细胞正常生长状态，避免因清除剂引起的细胞损伤。

高效便捷

简单易用的添加方式，无需更换培养基或改变培养条件，直接添加到受污染的培养基中即可发挥清除作用。

快速见效

通常在24-48小时内开始显现清除效果，一周内可完全清除支原体污染，恢复细胞健康状态。

适用广泛

适用于各种贴壁细胞和悬浮细胞的支原体污染清除，兼容多种常用培养基体系。

组分（以CR1005-P-003S，3X1mL /盒为例）

支原体清除试剂A 1000×（1mL），-20℃，避光

支原体清除试剂B 1000×（1mL），-20℃，避光

支原体清除试剂C 1000×（1mL），-20℃，避光

使用方法

1. 取50mL无菌离心管于超净工作台中，取出支原体清除试剂并置于超净工作台中使其充分融化。
2. 配置50mL完全培养基，然后分别取50μL支原体清除试剂A、B、C，依次加入到该培养基中，颠倒混匀后，即为支原体清除培养基，支原体清除试剂用完后应立即放回-20℃冻存，严禁长时间置于室温以及4℃环境中；
3. 取出被支原体污染的细胞，取1mL培养基置于1.5mL无菌离心管中，用于检测支原体污染情况；弃去培养基，用无菌1×PBS清洗细胞一次；
4. 加入1mL 0.25%的胰蛋白酶溶液，使其均匀地覆盖住细胞表面，然后去除胰蛋白酶溶液，将其至于37℃培养箱中孵育数十秒钟，直至细胞变圆，能够相对轻松地洗下来为止（对于难消化的细胞，可将0.5mL 0.25%胰蛋白酶加入到细胞中，然后直接置于37℃培养箱中孵育数分钟，待细胞变圆后用移液枪吸取少量胰蛋白酶轻轻吹打，看能否将细胞充分洗下来，然后再加入0.5mL完全培养基终止消化，将细胞充分解离吹打下来后，置于1.5mL无菌离心管中，室温1000rpm/min离心3min后，去除上清液），加入1mL无菌1×PBS将细胞充分悬起，并用1mL移液枪反复轻轻吹打细胞，将细胞充分分散开；
5. 室温1000rpm/min离心3min后，去除上清液，再加入1mL无菌1×PBS将细胞充分悬起，并用1mL移液枪反复轻轻吹打细胞，将细胞充分分散开；
6. 室温1000rpm/min离心3min后，去除上清液，再加入1mL无菌1×PBS将细胞充分悬起，并用1mL移液枪反复轻轻吹打细胞，将细胞充分分散开；
7. 室温1000rpm/min离心3min后，去除上清液。
8. 取1mL支原体清除培养基将细胞轻轻重悬起来，并将其转移至新的培养皿（或培养瓶）中，加入相应量培养基2倍量的支原体清除培养基（如6cm培养皿正常加入5mL培养基，而加入支原体清除培养基则需加入10mL），轻轻混匀后将细胞置于37℃培养箱中培养；
9. 将剩余支原体清除培养基密封好后置于4℃环境中保存；
10. 隔一日后，取1mL培养基置于1.5mL无菌离心管中，用于检测支原体污染情况；然后按照步骤3~9重复操作一次；
11. 再隔一日后，取1mL培养基置于1.5mL无菌离心管中，用于检测支原体污染情况；然后按照步骤3~9重复操作一次；
12. 待检测到无支原体污染后，更换新鲜的支原体清除培养基培养，继续巩固治疗2~3天，然后换成普通的完全培养基进行培养，后期可以进行扩大培养并保存细胞种株，在冻存细胞前，建议再进行支原体检测一次，以免出现污染未彻底清除或者再次出现被污染的情况。

注意事项

1. 本试剂盒对于部分细胞会产生抑制作用，去除本清除试剂用正常的完全培养基培养几天后细胞会回复正常生长，因此建议在做支原体清除过程前，所用细胞量尽可能多，如＞1×106个细胞，尤其是生长速度本身就较为缓慢的细胞，否则在做3次支原体清除后细胞的数量可能不足而导致细胞绝种；
2. 支原体清除试剂A、B、C三者的溶剂不同，严禁将其混合在一起后再加入到培养基中；且要避免强光照射，避免长时间在高温环境中。一旦试剂出现棕色或者黑色，应立即停止使用；
3. 每次配置的支原体清除培养基不应太多，避免长时间在4℃环境中储存，最好每次都新鲜配制，防止试剂失效；
4. 支原体清除干净的细胞，应谨慎避免其再次被污染，对于不同的细胞应分开操作，使用的试剂耗材尽量和其他细胞分开，从而减少再次被污染的风险；
5. 上述操作中，用1×PBS清洗三次至关重要，请勿忽略！
6. 最终去除结果可搭配我司MTM100免提取支原体检测试剂盒（qPCR法）验证。

质量保证

无忧售后：使用过程中有任何问题，可联系我们；产品质量问题我们保证可靠售后。

购买信息

价格优惠：具体价格请咨询库源生物销售团队或经销商。

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