通用型屏障类器官芯片 Universal Barrier Chip CR217-3

产品名称：通用型屏障类器官芯片Universal Barrier Chip

货号：CR217-3

规格：独立包装，EO灭菌，一张板有3个单元，三个/盒，独立包装，EO灭菌，一张板有3个单元

存储条件：室温，避光  

有效期：3年

仅科研使用 Research Use Only

 

产品简介

通用型屏障类器官芯片Universal Barrier Chip是一款用于3D动态多细胞共培养的通用型屏障类器官芯片，适用于构建多种体外组织模型，如血管屏障、血脑屏障、肠屏障、肺屏障、肿瘤模型及类器官培养等。

每片芯片含3个独立单元，每个单元设3条微通道：中央为凝胶通道，两侧为培养基通道。各通道设有独立入口与出口，出口外设储液池。

产品标配独立上盖，无需支架，操作简便，兼容多种成像系统。

 

使用说明

【实验前准备】

拆封灭菌：在生物安全柜内，使用75%乙醇喷洒腔室外包装，静置5分钟后拆封。使用前建议辅以紫外照射30分钟。

 

3D基质准备与填充（冰上操作）

配制：根据实验需求配制基质胶。

胶原凝胶配制（冰上操作）：按预定配方充分混匀10×PBS、I型胶原、0.5M NaOH、去离子水；也可使用实验适配的其他水凝胶。

胶原溶液吸取：用1–10μl移液枪吸取10μl胶原溶液，全程保持冰上保存，防止提前聚合。

凝胶灌注（*灌注过程需缓慢，防止冲溢；**灌注过程中关注是否到达顶端，到达另一侧灌注口后切勿继续打液，防止溢胶；***未聚合凝胶的芯片需轻拿轻放，避免漏胶）：

-方法1：从凝胶进样口一侧灌注至柱端附近，再从另一侧进样口灌注至胶面汇合。

-方法2：单侧全程灌注至另一侧出口，轻柔推液，防止溶液溢出。

湿度维持：向储液槽加入无菌水；或使用无菌枪头盒加水创造湿润环境，需提前37℃预热（37℃为推荐聚合温度，温度波动会影响聚合效果）。

凝胶聚合：将芯片放入37℃培养箱孵育30分钟，使胶原完全聚合。

 

培养基通道包被

包被液注入：孵育结束后，将枪头插入培养基通道进样口，注入15μl包被液（如50μg/ml纤连蛋白，用培养基或1×PBS稀释），另一侧通道重复操作；无需包被则用培养基进行润湿。

包被孵育：将芯片放入37℃培养箱孵育1小时（或根据包被试剂要求调整孵育时间）。

包被液冲洗：同一通道中，一侧加样口加入70μl培养基，对侧加入50μl，冲掉通道内的包被液，另一侧通道重复操作；若需彻底清除包被液，可重复冲洗2次。

*后续灌注需轻柔，防止高水压破坏已聚合的胶原凝胶；**胶原聚合后若不立即使用，需润湿通道，防止凝胶干燥开裂。

 

细胞接种

细胞消化：常规消化细胞，弃去旧培养基，用1×PBS清洗细胞2次，加入胰酶覆盖瓶底，放入CO₂培养箱孵育2分钟。

终止消化：确认细胞完全脱壁，加入至少5倍胰酶体积的含血清培养基，终止胰酶消化作用。

细胞离心：将细胞悬液转入15 ml离心管，室温下250×g离心5分钟。

悬液配制：用培养基重悬细胞，调整细胞密度至0.5–3×10^6 cells/ml；其中内皮细胞推荐密度为1.5×10^6 cells/ml，过夜培养可形成致密单层。

细胞接种：吸取10μl细胞悬液，将枪头靠近培养基进样口缓慢注入，等待2分钟后，在对侧进样口重复操作；每通道共接种20μl细胞悬液，额外加入40μl液体形成液位差，产生间质流助力细胞贴附胶界面。

分布观察：显微镜下观察细胞分布情况，若分布不佳，调整细胞浓度后重新接种。

双细胞接种：若需在对侧通道接种第二种细胞，先将芯片放入培养箱孵育30分钟，使第一种细胞贴壁，再重复上述接种步骤。

培养放置：将接种好细胞的芯片放入培养箱，进行后续培养操作。

*接种前加样口需加满培养基，确保细胞悬液顺利流入通道; **枪头不完全插入进样口，避免流速过快导致细胞分布不均, ***芯片需水平放置，倾斜会干扰流场及细胞分布。

3.5换液

换液时机：细胞接种后2–4小时进行首次换液，黏附能力较差的细胞可适当延长换液时间。

换液操作：从储液槽轻柔吸走4个加样口的旧培养基；换液时，同一通道一侧加入70μl新鲜培养基，对侧加入50μl，另一侧通道重复操作。

后续培养：将芯片放回培养箱；内皮细胞通常1天可形成致密单层，长期培养需每日换液。

*两侧培养基体积差可实现通道内有效换液，最小换液体积为30μl，推荐使用50μl; **禁止从进样口直接吸液，避免误吸通道内液体损伤细胞或凝胶。

常见问题

胶原灌注与聚合问题

胶原溢入培养基通道

可能原因： 灌注压力过高、灌注体积超量、胶原提前聚合。

解决方法： 操作时轻柔推液；严格控制体积（只用 10 μl）；全程保持冰上操作以防提前凝固。

培养基通道串液

可能原因： 胶原聚合时间不足、胶原批次存在差异。

解决方法： 适当延长聚合时间；更换其他批次的胶原进行尝试。

 

气泡问题

通道内有气泡

可能原因： 聚合环境湿度过低；试剂未重复回温，有溶解氧析出

解决方法： 务必在支架储液槽中加水，保证足够的湿度；所有不要求低温的试剂充分回温。

 

细胞接种与分布问题

细胞分布不均

可能原因： 两次接种的间隔时间过短。

解决方法： 在进行对侧接种前，建议等待至少 2 分钟。

通道内细胞过多

可能原因： 细胞悬液浓度过高。

解决方法： 降低细胞悬液浓度后重新接种。

通道内细胞过少

可能原因： 细胞悬液浓度过低。

解决方法： 提高细胞悬液浓度后重新接种。

细胞不贴胶界面

可能原因： 液位差产生的压力不足；包被失败。

解决方法： 增加细胞悬液的体积以提供足够的压力；检查包被液是否失效。

 

本产品仅供科研使用！

购买信息

货号	产品规格	官网价	图片
CR217-3	独立包装，EO灭菌，一张板有3个单元	300 CNY
	3个/盒，独立包装，EO灭菌，一张板有3个单元	900 CNY

 

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