上层腔室开放灌流类器官芯片 Open-Top Perfusion Chip CR219-2

产品名称：上层腔室开放灌流类器官芯片 Open-Top Perfusion Chip

货号：CR219-2

规格：独立包装，EO灭菌，平行2通道，上层腔室开放

存储条件：室温，避光  

有效期：3年

仅科研使用 Research Use Only

 

产品简介

上层腔室开放灌流类器官芯片是一款面向动态细胞培养与流体刺激研究的微流控培养平台。芯片采用上端开放式培养区（open-top reservoir）结合封闭式微流控通道的结构设计，使研究者能够像使用传统培养器皿一样便捷地进行加样、换液和处理，同时兼具微流控系统对流体环境的精确控制能力。

该芯片支持在微流控通道内对细胞施加稳定、可控的层流或剪切应力，同时通过上端开口区域实现直接接种细胞、组织或水凝胶，避免复杂管路操作，显著降低实验门槛。

芯片材料具有良好的生物相容性和光学透明度，兼容常规倒置显微镜和活细胞成像系统，支持短期或长期动态培养实验。

 

应用场景

1.肝芯片

·在多孔膜上方直接构建三维肝实质微组织，

 并与下层内皮灌流形成类窦状结构。

·可做药物性肝损伤（DILI）：上层组织侧

 直接给药/换液，下层模拟血流剪切与药物运输。

·可做肝纤维化：上层3D肝细胞-星状细胞

 在胶原/基质胶中更接近ECM环境，

 下层内皮灌流提供炎症/因子输入。

·可做局部点胶与分区模型：例如只在开口

  区域点胶形成“肝结节”，周围保持液相对照区。

2. 皮肤芯片

·在开口膜上方直接铺设胶原/基质胶并种角

 质形成细胞、成纤维细胞，形成真皮-表皮结构。

·可以进行顶部滴加/喷涂/贴片式处理（化妆品、外用药、刺激物）。

·可以做创伤模型：直接在开口处做划伤/打

 孔/局部去除胶层，然后观察修复与炎症反应。

组织可挖出做HE/免疫荧光/屏障蛋白（filaggrin、loricrin等）检测。

3. 可取样的“挖出式组织芯片”

·上层构建的3D组织（肝/肿瘤/纤维化/皮肤等）可在任意时间点直接挖取。

·支持多时间点终点检测（转录组、蛋白质组、代谢组、药物浓度、病理切片）。

·也适合做“患者来源细胞/类器官片段”的快速构建-取样-分析流程。

 

 

 

 

使用说明

【实验前准备】

拆封灭菌：在生物安全柜内，使用75%乙醇喷洒腔室外包装，静置5分钟后拆封。使用前建议辅以紫外照射30分钟。

预温：有条件的，在使用前将芯片置于培养箱中预温一夜。培养基也需实验前水浴锅37℃预热，以避免气泡产生。

 

通道预处理与包被

1.向进液孔打入包被液体，充满整个通道后，按试剂说明条件孵育。

2.如需在通道顶部接种细胞，可将芯片倒置孵育，以增强涂层在通道上层的沉积；

3.在进液口打100μL PBS清洗，从出液口将清洗液吸入通道，反复几次，可轻轻倾斜芯片，使缓冲液在储液槽间流动，以提高冲洗效果。

4.在播种细胞前，完全吸除通道内液体。

*后续灌注需轻柔，防止高水压破坏已聚合的胶原凝胶；**胶原聚合后若不立即使用，需润湿通道，防止凝胶干燥开裂。

 

 

接种细胞

接种顺序：建议先接种通道，待细胞贴壁后再接种培养孔。

在通道下方接种（Seeding underneath the membrane）

1.通过进液小孔向下方通道加入与通道体积完全相等的培养基/细胞悬液

2.盖上入口，将芯片倒置并孵育直至细胞完全贴附（时间随细胞类型而异）。

3.细胞贴附后，向储液槽补加培养基，盖上并继续孵育。

3D培养提示：如接种水凝胶，可每10秒翻转一次芯片（上下翻转），持续数分钟（依据胶体凝固时间）以获得均匀的三维分布。3D培养可在上/下任一通道进行；为便于倒置显微镜观察，建议将水凝胶接种在下方通道。

注意：通道不可干涸；充分利用蒸发补液槽

在通道上方接种（Seeding on the membrane）

1.通过进液小孔向上方通道加入与通道体积相等的细胞悬液。向蒸发补液槽加入PBS或水，孵育直至细胞完全贴附。

2.细胞贴附后向储液槽补加培养基，盖上并孵育，直至汇合（confluence）。

3.按细胞需求定期换液（建议每1–2天一次）。

注意：换液时避免把通道内培养基吸空，以防气泡进入。应在进液小孔外打入足量培养基后在出液口将液体吸入通道，抽吸时应将枪头远离进液小孔。

细胞贴附后（接种后约2–6小时），建议开始持续更新通道内培养基，以获得更佳的贴壁效果与稳态环境。

培养孔接种（Seeding on the well）

计算好细胞浓度，直接加入培养孔中。

 

静态培养（Static culture）
换液（medium refresh）
换液时机：细胞接种后2–4小时进行首次换液，黏附能力较差的细胞可适当延长换液时间。

换液操作：轻轻倾斜芯片，待液体因重力作用汇集到一侧储液池中，用吸头吸去；加液时可轻轻在一侧储液池中打入新培养基，平置等待培养基达到水平。

*两侧培养基体积差可实现通道内有效换液; **禁止从进样口直接吸液，避免误吸通道内液体损伤细胞或凝胶。

 

灌流培养（Perfusion culture）

流体系统连接与运行

在建立流动系统前

1.所有培养基、管路及接口应提前灭菌并在37°C下预温；

2.确保细胞已充分贴壁（建议接种24小时后再进行流动实验）；

3.保持进出口通道始终充满培养液，避免气泡进入。

 

连接步骤

1.去除储液槽内培养液。

2.连接出口接口并确认密封。

3.预灌入口连接管路再组装，以排除气泡。

4.连接入口接口后启动泵流系统。

5.检查连接是否漏液，再放入培养箱运行。若连接不严，储液槽会被回流液体灌满。

6.适配接口：1/4-28 UNF

7.支持系统：摇床、注射泵、蠕动泵、压力泵等。

常见培养模型

常见问题

气泡问题

通道内有气泡

可能原因： 聚合环境湿度过低；试剂未重复回温，有溶解氧析出

解决方法： 务必在支架储液槽中加水，保证足够的湿度；所有不要求低温的试剂充分回温。

 

细胞接种与分布问题

细胞分布不均

可能原因： 两次接种的间隔时间过短。

解决方法： 在进行对侧接种前，建议等待至少 2 分钟。

通道内细胞过多

可能原因： 细胞悬液浓度过高。

解决方法： 降低细胞悬液浓度后重新接种。

通道内细胞过少

可能原因： 细胞悬液浓度过低。

解决方法： 提高细胞悬液浓度后重新接种。

细胞不贴胶界面

可能原因： 液位差产生的压力不足；包被失败。

解决方法： 增加细胞悬液的体积以提供足够的压力；检查包被液是否失效。

 

本产品仅供科研使用！

购买信息

货号	产品规格	官网价	图片
CR219-2	独立包装，EO灭菌，平行2通道，上层腔室开放	499 CNY

 

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